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細(xì)胞計(jì)數(shù)時(shí)的要點(diǎn)你都清楚么?

  • 發(fā)布日期:2022-04-26      瀏覽次數(shù):3170
    •   細(xì)胞計(jì)數(shù)又稱血球計(jì)數(shù)板法,是細(xì)胞計(jì)數(shù)方法,顯微鏡下調(diào)整不同放大倍數(shù)的物鏡,通過(guò)染色的方法人工觀察細(xì)胞狀態(tài)判斷細(xì)胞死活,進(jìn)行計(jì)數(shù)。通過(guò)檢測(cè)出一定體積的均勻細(xì)胞懸液中的細(xì)胞個(gè)數(shù)(對(duì)一定數(shù)量的小格或中格計(jì)數(shù),根據(jù)相應(yīng)的小/中格所占的體積,可以推算出單位體積的溶液中微生物細(xì)胞的密度或總數(shù)),換算出每毫升的細(xì)胞個(gè)數(shù),從而得到細(xì)胞懸液的細(xì)胞濃度。實(shí)驗(yàn)過(guò)程中采用五點(diǎn)取樣法,即一般隨計(jì)數(shù)室四角上的四個(gè)中方格以及正中間的一個(gè)中方格進(jìn)行統(tǒng)計(jì)(對(duì)于壓線的,采取數(shù)上不數(shù)下,數(shù)左不數(shù)右的原則)。這種方法數(shù)細(xì)胞的原則是只數(shù)完整的細(xì)胞,若細(xì)胞聚集成團(tuán)時(shí),按照1個(gè)細(xì)胞計(jì)算。
        細(xì)胞計(jì)數(shù)要點(diǎn):
        ①進(jìn)行細(xì)胞計(jì)數(shù)時(shí),要求懸液中細(xì)胞數(shù)目不低于1×107 L-1,如果細(xì)胞數(shù)目很少要進(jìn)行離心再懸浮于少量培養(yǎng)液中。
        ②要求細(xì)胞懸液中的細(xì)胞分散良好,否則影響計(jì)數(shù)準(zhǔn)確性。
        ③取樣計(jì)數(shù)前,應(yīng)充分混勻細(xì)胞懸液,尤其時(shí)多次取樣計(jì)數(shù)時(shí)更要注意每次取樣都要混勻,以求計(jì)數(shù)準(zhǔn)確。
        ④數(shù)細(xì)胞的原則是只數(shù)完整的細(xì)胞,若細(xì)胞聚集成團(tuán)時(shí),只按照1個(gè)細(xì)胞計(jì)算。如果細(xì)胞壓在格線上時(shí),則只計(jì)上線,不計(jì)下線,只計(jì)右線,不計(jì)左線。
        ⑤操作時(shí),注意蓋片下不能有氣泡,也不能讓懸液流入旁邊槽中,否則要重新計(jì)數(shù)。
        初學(xué)者易犯的錯(cuò)誤:計(jì)數(shù)前未將待測(cè)懸液吹打均勻。滴入細(xì)胞懸液時(shí)蓋玻片下出現(xiàn)氣泡。滴入懸液時(shí)的量太多,至使細(xì)胞懸液流入旁邊的槽中。
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